Centrifugiranje je važna sekvenca u preanalitičkoj fazi. Prvenstveno treba voditi
računa: da se odvajanje seruma iz pune krv izvrši neposredno posle završene koagulacije, jer
duži kontakt sa koagulomom može da dovede do gubitka ili povećavanja koncentracija izvesnih analita u ispitivanom serumu (reakcije materija i koaguluma, najčešće sa eritrocitima; kalijum,glukoza,..),a takođe u što kraćem intervalu početi sa analizom. Centrifugiranje se često koristi posle odmrzavanja uzoraka radi odklanjanja mogućih partikula, mikrokoaguluma i sl.,
eventualno prouzrokovanih biohemizmima u procesu hlađenja.
CENTRIFUGIRANJE
Centrifugiranje
koagulisane krvi da bi se dobio serum treba izvršiti kad se utvrdi da je
koagulacija
potpuna. Normalno
vreme koagulacije je oko 30 minuta. Centrifugiranje koagulaisane krvi da bi se
dobio serum
ili antikoagulisane krvi da se izdvoji
plazma izvodi se sa centrifugalnom
silom (g) od
1000 do 2000 g, 10 do 15 minuta. Za dobijanje plazme bez trombocita
potrebno je centrifugiranje od
10-15 minuta na 2000-3000 g. Koagulaciona procedura za
citratnu plazmu zahteva centrifugiranje na 2000 g 15 minuta. U laboratoriji se obično sve računa sa brojem obrtaja pro minut (rpm) i manje više ne
poznaje se ( rcf ) = relativna centrifugalna sila (g). Svaka laboratorija može sama da prekontroliše g svojih centrifuga primenom nomografa ili sledeće
empirijske jednačine:
g ( rcf) = 1.118 x 10-5 x r x rpm2
gde je r = srednja
radijalna dužina u cm od ose rotacije do dna epruvete; a 1.118 x 10-5je konstanta izvedena iz centrifugalne sile kao multipl
od g. Centrifuge sa
horizontalnim rotorom (“swing-out”) imaju prednost
u rutinskoj laboratoriji.
Uzorke treba centrifugirati što je moguće pre, a najdalje u
roku od 2 čaca po uzimanju uzorka. Izvesni analiti podležu značajnim promenama
ako se ne odvoje od krvnih ćelija (kalijum raste, glukoza opada, f-PSA
menja,itd.). Za stabilnost konstituenata u uzorku, najčešći uzroci promena
kvaliteta uzorka su:
metabolizam krvnih ćelija; isparavanje/sublimacija; hemijske reakcije;
mikrobiološko
razlaganje; osmoza; svetlosni efekti;
difuzija gasova.
|